在生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、食品安全及環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域,核酸(DNA/RNA)作為遺傳信息的載體,既是研究的核心對(duì)象,也可能成為交叉污染的“隱形推手”。實(shí)驗(yàn)環(huán)境中,微量核酸殘留(如PCR產(chǎn)物、質(zhì)粒、病毒基因組片段)可通過(guò)氣溶膠、移液器、臺(tái)面接觸等途徑擴(kuò)散,導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果、數(shù)據(jù)失真。而核酸清除劑的出現(xiàn),正以高效、精準(zhǔn)的消殺能力,成為阻斷這一風(fēng)險(xiǎn)鏈的關(guān)鍵工具。 一、交叉污染:核酸殘留引發(fā)的“蝴蝶效應(yīng)”
交叉污染的本質(zhì)是不同樣本或?qū)嶒?yàn)體系的核酸物質(zhì)意外混合,其危害遠(yuǎn)超普通微生物污染。例如,在新冠病毒核酸檢測(cè)中,若實(shí)驗(yàn)室臺(tái)面殘留前序陽(yáng)性樣本的RNA,后續(xù)檢測(cè)可能出現(xiàn)“假陽(yáng)性”,導(dǎo)致患者誤診或疫情防控誤判;在基因編輯實(shí)驗(yàn)中,外源質(zhì)粒DNA殘留可能干擾CRISPR系統(tǒng)的靶向效率,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可重復(fù);在腫瘤基因檢測(cè)中,不同患者的DNA交叉污染會(huì)直接影響突變位點(diǎn)的識(shí)別,威脅臨床診療的準(zhǔn)確性。
傳統(tǒng)清潔手段(如酒精擦拭、紫外線照射)對(duì)核酸的清除存在明顯局限:酒精僅能破壞蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),無(wú)法降解核酸鏈;紫外線雖可斷裂核酸鍵,但穿透力弱,難以覆蓋復(fù)雜表面(如移液器內(nèi)壁、多孔板縫隙);含氯消毒劑雖能氧化核酸,卻可能腐蝕設(shè)備且對(duì)環(huán)境不友好。這些短板使得核酸殘留成為長(zhǎng)期困擾實(shí)驗(yàn)室的“頑疾”,而核酸清除劑的研發(fā)與應(yīng)用,正是針對(duì)這一痛點(diǎn)的精準(zhǔn)突破。
二、作用機(jī)制:從“物理清除”到“化學(xué)降解”的雙重保障
核酸清除劑的核心優(yōu)勢(shì)在于其“靶向性”。其作用機(jī)制可分為兩步:第一步為物理剝離,通過(guò)表面活性劑降低液體表面張力,滲透至核酸與物體表面的結(jié)合位點(diǎn)(如靜電吸附、氫鍵作用),將殘留核酸從材質(zhì)孔隙、劃痕中“剝離”;第二步為化學(xué)降解,利用酶學(xué)或化學(xué)試劑切斷核酸鏈的磷酸二酯鍵——例如,含核酸酶的清除劑可特異性水解DNA/RNA的糖苷鍵與磷酸鍵,將其分解為無(wú)感染性的寡核苷酸或小分子;非酶類清除劑則通過(guò)強(qiáng)氧化性物質(zhì)(如過(guò)硫酸鹽)或螯合劑(如EDTA)破壞核酸的空間結(jié)構(gòu),使其失去復(fù)制與轉(zhuǎn)錄能力。
相較于傳統(tǒng)方法,核酸清除劑的優(yōu)勢(shì)顯著:其一,廣譜性,可同時(shí)清除dsDNA、ssRNA、質(zhì)粒、游離核酸等多種類型;其二,長(zhǎng)效性,部分產(chǎn)品添加成膜成分,可在表面形成保護(hù)屏障,延緩二次污染;其三,兼容性,低腐蝕性配方適配PCR儀、測(cè)序儀、生物安全柜等精密儀器,避免設(shè)備損耗。
三、場(chǎng)景化應(yīng)用:從實(shí)驗(yàn)室到現(xiàn)場(chǎng)的防控實(shí)踐
核酸清除劑的價(jià)值已在多領(lǐng)域得到驗(yàn)證。在新冠疫情期間,第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室采用含核酸酶的清除劑每日處理操作臺(tái)面、移液器及生物安全柜,配合分區(qū)操作規(guī)范,使假陽(yáng)性率從早期的3%-5%降至0.1%以下;在基因治療研發(fā)中,CAR-T細(xì)胞制備實(shí)驗(yàn)室通過(guò)使用無(wú)酶型清除劑處理培養(yǎng)箱與管路系統(tǒng),成功避免了外源質(zhì)粒DNA對(duì)細(xì)胞改造效率的干擾;在海關(guān)檢驗(yàn)檢疫現(xiàn)場(chǎng),便攜式核酸清除噴霧可快速處理采樣管外壁、防護(hù)裝備表面,降低跨境運(yùn)輸中病毒RNA的交叉?zhèn)鞑ワL(fēng)險(xiǎn)。
值得注意的是,核酸清除劑的有效性需依賴規(guī)范使用:需根據(jù)場(chǎng)景選擇酶型或非酶型產(chǎn)品(如PCR實(shí)驗(yàn)室優(yōu)先選無(wú)酶型以避免引物干擾),控制作用時(shí)間(通常5-15分鐘),并結(jié)合機(jī)械擦拭增強(qiáng)清除效果。此外,定期監(jiān)測(cè)(如熒光定量PCR檢測(cè)表面殘留)是確保防控效果的必要環(huán)節(jié)。