蛋白酶K的配制標(biāo)準(zhǔn)及保存方法

　　蛋白酶Ｋ主要應(yīng)用于基因檢測中基因抽取，是檢測試劑盒生產(chǎn)的重要原料，蛋白酶K產(chǎn)品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而被廣泛應(yīng)用于制備脈沖電泳的染色體DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶?，F(xiàn)有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。

　　蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinaseK)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K*溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

　　蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融，有效保證12月。

　　蛋白酶K在原位雜交技術(shù)中通常用于雜交前的處理，它具有消化包圍靶DNA蛋白質(zhì)的作用，以增加探針與靶核酸結(jié)合的機(jī)會，提高雜交信號.但蛋白酶K的濃度過高、消化時(shí)間過長或孵育溫度過高時(shí)，都會對細(xì)胞的結(jié)構(gòu)有一定的破壞，導(dǎo)致組織切片的脫落，細(xì)胞核的消失，從而影響雜交結(jié)果。EDTA緩沖液可以替代蛋白酶K的作用，解決上述出現(xiàn)的問題，并能達(dá)到理想的染色效果。