線粒體染色試劑盒可以標(biāo)記活細(xì)胞中的線粒體，使之帶紅色熒光(Ex/Em =575/600nm)(Texas Red filter) 本試劑盒使用染料為一種疏水性復(fù)合物，屬線粒體選擇性染料，該染料能輕易進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi)，通過(guò)線粒體膜電位變化滲透進(jìn)入線粒體，并在線粒體中富集。Smart Cell線粒體染色試劑盒提供了標(biāo)記線粒體的全套試劑，能提供藍(lán)色/綠色/紅色/橙色等不同熒光供選擇，既可單獨(dú)使用，也支持對(duì)細(xì)胞的多重?zé)晒夥治?。這種的細(xì)胞標(biāo)簽為從空間上和時(shí)間上研究發(fā)生的細(xì)胞活動(dòng)提供了一種十分有效的方法。
線粒體染色試劑盒檢測(cè)原理，L-谷氨酰胺是人體蛋白質(zhì)所必需的20種氨基酸之一。是人體內(nèi)zui普遍的、不可缺乏的條件性必需氨基酸，是構(gòu)成蛋白質(zhì)*的氨基酸之一，更是某些細(xì)胞培養(yǎng)中zui基本的元素。由于谷氨酰胺不穩(wěn)定的特性，在細(xì)胞培養(yǎng)基的整合中，易自發(fā)性分解為谷氨酸和氨離子，而氨離子對(duì)細(xì)胞的毒性很強(qiáng)，因此，在細(xì)胞培養(yǎng)體系中，須密切關(guān)注谷氨酰胺的儲(chǔ)存壽命（SHELF LIFE）和實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。在谷氨酰胺酶和谷氨酸脫氫酶的雙酶循環(huán)反應(yīng)系統(tǒng)中，L-谷氨酰胺首先發(fā)生脫氨基反應(yīng)，產(chǎn)生谷氨酸和氨離子。
線粒體染色試劑盒細(xì)胞染色，貼壁細(xì)胞，在96孔板（100μL）或培養(yǎng)皿內(nèi)培養(yǎng)細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到70-80%融合度，在96孔板或培養(yǎng)皿內(nèi)添加等體積的染色工作液(步驟1.2)，在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長(zhǎng)培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TRITC設(shè)置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察。注意：如果細(xì)胞沒(méi)有充分染色，可以適當(dāng)增加染料濃度或增加染色時(shí)間進(jìn)行改善。懸浮細(xì)胞: 在1000 rpm 條件下離心細(xì)胞培養(yǎng)液5分鐘，棄去上清，用預(yù)熱好的細(xì)胞培養(yǎng)液溫和的重懸細(xì)胞，然后添加等體積的染色工作液(步驟1.2)在37°C, 5% CO2條件下培養(yǎng)細(xì)胞30分鐘-2小時(shí)。用HHBS [含20mM Hepes的Hanks緩沖液]或用自配Buffer(Hanks Buffer 與生長(zhǎng)培養(yǎng)基按1:1)替換色染液。同TexasRed設(shè)置在顯微鏡下進(jìn)行熒光觀察。
更新時(shí)間：2018-07-10
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