溶酶體染色試劑盒實驗前的準備工作

 

  溶酶體染色試劑盒是細胞控制其生長潛能的保障機制一般含義是復(fù)制衰老（Replicative senescence，RS），指正常細胞經(jīng)過有限次數(shù)的分裂后，停止分裂，此時細胞雖然是存活的，但是細胞形態(tài)和生理代謝活性發(fā)生明顯變化的現(xiàn)象。體外衰老細胞研究常用的生物學(xué)特征包括不可逆的生長停滯；）與衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶senescence associated β-galactosidase, SA β-gal）的活化。作為溶酶體內(nèi)的水解酶，通常在pH 4.0的條件下表現(xiàn)活性。但是衰老細胞內(nèi)其在pH 6.0的條件下表現(xiàn)活性，且隨著傳代次數(shù)的增加，細胞群體中表現(xiàn)衰老相關(guān)的β-半乳糖苷酶的細胞數(shù)目逐漸增加。

 

  溶酶體染色試劑盒注意事項，為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作，本試劑盒固定液B存在一定的腐蝕性和毒性，操作時請注意小心防護。染色液E剛剛?cè)芙夂髸^察到有沉淀，屬正?，F(xiàn)象，充分混勻或者漩渦震蕩可促使沉淀全部溶解，之后用于染色實驗。X-Gal溶液需要避光保存。染色工作液也需要避免光照。染色后的細胞樣品可以在 4ºC冰箱保存，但也需避免光照。細胞β-半乳糖苷酶活性強，孵育3 h即顯示陽性；細胞β-半乳糖苷酶活性弱，則需要孵育24 h。細胞染色zui長孵育時間為 24 h。細胞呈現(xiàn)藍色的部位即為衰老細胞特異性β-半乳糖苷酶活性部位。細胞衰老β-半乳糖苷酶染色反應(yīng)依賴于特定的pH值，不能用于細胞培養(yǎng)的CO2培養(yǎng)箱中進行染色反應(yīng)。因為CO2培養(yǎng)箱中較高濃度的CO2會影響染色工作液的pH值，導(dǎo)致染色失敗。本試劑盒適合各種類型和規(guī)格的培養(yǎng)細胞：載玻片，載玻片培養(yǎng)皿，35 mm 培養(yǎng)皿和各種孔數(shù)的細胞培養(yǎng)板，只需按照一定的比例調(diào)整工作液用量即可。